Metoda 1: Metoda ekstrakcije (Metoda, ki se trenutno uporablja v moji državi; daje nižjo čistost, vendar ponuja nižje proizvodne stroške.)
Ekstrakcija raztopine oksitocina: Vzemite 100 g posušenega prahu posteriorne hipofize in 30 g kremenčevega prahu, ju postavite v kroglični mlin in dodajte destilirano vodo. Izvedite ekstrakcijo štirikrat po istem postopku. Prostornine dodane destilirane vode za vsako stopnjo so naslednje: 1,4 L za prvi dve ekstrakciji in 1,3 L za naslednji dve. Vsaka ekstrakcija se izvaja 45 minut, čemur sledi centrifugiranje za zbiranje tekočine; preostali ostanek se nato podvrže nadaljnji ekstrakciji. Štiri nastale izvlečke združimo, da dobimo raztopino oksitocina. Če povzamemo: posušen prah posteriorne hipofize [voda, kroglični mlin] → izvleček oksitocina → kromatografsko ločevanje.
Vzemite 1.500 g predhodno obdelanega sintetičnega zeolita, dodajte 20 L 0,25-odstotne raztopine ocetne kisline in mešanico-po mešanju-zlijte v ionsko{7}}izmenjevalno kolono. Ko raven raztopine ocetne kisline pade na točko 2–3 cm nad površino zeolitnega sloja, takoj dodajte ekstrakt oksitocina. Ohranite ustrezno hitrost pretoka in zberite nastali bel, moten eluat (ta frakcija vsebuje predvsem oksitocin; ker ima oksitocin izoelektrično točko [pI] 7,7-medtem ko ima vazopresin pI 10,9-vazopresin zlahka tvori pozitivne ione in se tako adsorbira na kolono). Takoj ko nivo tekočine ekstrakta pade na površino zeolitnega sloja, takoj dodajte destilirano vodo in nadaljujte z zbiranjem motnega eluata, dokler tok ne preneha. Naravnajte pH zbranega motnega eluata na 3,5 z uporabo ledocetne kisline. Raztopino hitro segrejte v vodni kopeli na 95 stopinj, vzdržujte to temperaturo 3 minute, nato raztopino hitro ohladite in jo čez noč postavite v hladilnik. Če povzamemo: izvleček oksitocina [HAc, kolona s sintetičnim zeolitom] → motni eluat [HAc, segrevanje] → ločena raztopina → adsorpcija in elucija. Naslednji dan filtrirajte ohlajeno raztopino. Filtratu med mešanjem dodamo 10 % bentonitno brozgo (dodamo 3 ml brozge na 100 ml filtrata). Nadaljujte z mešanjem 1 uro, da olajšate adsorpcijo, nato mešanico centrifugirajte. Testirajte supernatant z raztopino reagenta sulfosalicilne kisline; odsotnost kakršne koli oborine pomeni, da je proces adsorpcije končan. Če je adsorpcija nepopolna, ponovite postopek obdelave bentonita; nato združite oborino bentonita, dobljeno iz obeh stopenj adsorpcije. Bentonit se štirikrat eluira z 1 % ocetno kislino (z volumni 1,6 L, 1,4 L, 1,2 L oziroma 0,8 L). Za vsak eluat se doda *terc*-butiltriklorid, ko se raztopina segreje na 80 stopinj; temperaturo nato dvignemo na 95 stopinj, hitro ohladimo na 25 stopinj in bodisi filtriramo ali centrifugiramo. Štirje dobljeni filtrati se združijo, da se določi jakost in meja vazopresina. Potek postopka je naslednji: ohlajena raztopina [filtracija] → filtrat [bentonitna gošča] → adsorbat [1 % HAc] → eluat. Priprava injekcije oksitocina:
Testirana raztopina oksitocina, ki ustreza standardom kakovosti, se razredči do koncentracije 5 U/mL ali 10 U/mL. Nato ga filtriramo skozi lij iz sintranega stekla No. 4 ali No. 5, napolnimo v ampule in steriliziramo s tekočo paro pri 100 stopinjah 30 minut, da dobimo končni izdelek. Potek postopka je naslednji: Raztopina oksitocina (odobrena s preizkusom) [filtracija, polnjenje, sterilizacija] → Injekcija oksitocina.
Regeneracija sintetičnega zeolita: Sintetični zeolit dvakrat speremo z destilirano vodo. Nato dodamo 1,5 L vode (preračunano na 500 g zeolita) in 150 g natrijevega klorida ter mešanico mešamo 2 uri, da izperemo in odstranimo vazopresin. Zeolit nato speremo z destilirano vodo, dokler ne ostane več kloridnih ionov. Dodamo ustrezno količino vode in pH naravnamo na 9 z uporabo natrijevega hidroksida; zmes mešamo 30 minut, nato pa supernatant odlijemo. Zeolit speremo z destilirano vodo, pH naravnamo na 5,5–6 z žveplovo kislino in ponovno speremo z vodo, dokler ni skoraj nevtralen. Nato se filtrira, da se odstrani odvečna voda, in posuši pri 105 stopinjah za prihodnjo uporabo. Pred uporabo dodamo ustrezno količino vode in med mešanjem uravnamo pH z ledocetno kislino, da se omogoči namakanje. Priprava 10-odstotne bentonitne brozge: Bentonit in voda se zmešata v masnem-razmerju-prostornini 1:10. Zmes meljemo približno 1 uro, v tem času dodamo ocetno kislino, da ohranimo stabilen pH 3,5. Nastala kaša se nato shrani v hladilniku za prihodnjo uporabo. Metoda 2: Kemijska sinteza. Najprej se sintetizira heptapeptidni amid (segmenti 3–9) iz benziloksikarbonil-levcin *p*-nitrofenil estra; nato se sintetizira benziloksikarbonil-S-benzilcistein-tirozin azid (segmenti 1–2); v tretji stopnji pa se sintetizira oksitocin.